上海信帆技术讲座之IgA的分析和提纯-华强电子网

来源：华强电子网作者：华仔浏览：187 时间：2017-10-21 16:36

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摘要：（一）材料与试剂配制1．DEAE52纤维素2．0.10Mol/L ZnSO4液 ZnSO4·7H2O 2.88g 加水至1 000.00ml 3．饱和硫酸铵溶液4．10％EDTA—Na5．SephadexG2006．0.01Mol/L pH7.4PBS液 7．0.10Mol/L pH6.4PBS液8．血清（二）操作方法1．取血清加等量的0.1Mol/L ZnSO4液，调p

（一）材料与试剂配制
1．DEAE52
纤维素
2．0.10Mol/L ZnSO
₄
液 ZnSO
₄
·7H
₂
O 2.88g 加水至1 000.00ml
3．
饱和硫酸铵溶液
4．10％EDTA—
Na

5．SephadexG200
6．0.01Mol/L pH7.4PBS液
7．0.10Mol/L pH6.4PBS液
8
．血清

（二）操作方法
1．取血清加等量的0.1Mol/L ZnSO
₄
液，调pH至7.0，室温搅拌1h，离心去沉淀。
2．
于上清液
中加入等量的饱和硫酸铵溶液，混匀后静置30min或冰箱过夜。
3．10 000r/min离心10min，去上清。
4．取沉淀溶于4ml10％EDTA－Na溶液中。
5．
生理盐水中透析除盐
。
6．过DE
₅₂
柱，用0.01Mol/L pH7.4P
B液洗脱蛋白（IgG）弃去
。
7．换用0.1Mol/L pH6.4PB液洗脱，收
集蛋白峰，即为IgA
。
8．再过SephadexG200
柱，洗液为0
.01Mol/L pH7.4PBS（0.14Mol/L NaCl），收集洗脱液测OD
₂₈₀
值，取第一峰即为纯化IgA。
9．透析、浓缩
、鉴定

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